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20×快速蛋白電泳緩沖液(變性電泳,溶液型)

20×快速蛋白電泳緩沖液(變性電泳,溶液型)

產(chǎn)品編號:TG200

產(chǎn)品規(guī)格:500ml

數(shù)量
價(jià)格 ¥200

20×快速蛋白電泳緩沖液(變性電泳,溶液型)

●  產(chǎn)品組成:

貨號

名稱

規(guī)格

TG200

20×快速蛋白電泳緩沖液(變性電泳,溶液型)

500 ml

說明書

一份

產(chǎn)品簡介:

本產(chǎn)品為20×濃縮型快速蛋白電泳緩沖液,由Tris-Glycine電泳緩沖液優(yōu)化而來,適用于Tris-Glycine體系(Laemmli體系)蛋白凝膠電泳。與傳統(tǒng)的Tris-Glycine電泳緩沖液相比,使用本產(chǎn)品電泳時(shí)無需根據(jù)分離膠和濃縮膠調(diào)整不同電壓,可全程200-250 V恒壓電泳,約20-35 min可完成電泳(低于10%膠濃度),大大節(jié)約時(shí)間,并且對小分子蛋白分離效果更好,可使預(yù)染蛋白Marker中10 kD與15 kD條帶分離并清晰可見(凝膠濃度8%以上),達(dá)到快速高效分離蛋白的作用。本產(chǎn)品含有SDS,不適用于非變性電泳。本產(chǎn)品為20×濃縮液,使用前需要用水稀釋為1×后使用,無需調(diào)節(jié)pH值,pH 8.0-8.5。

貯存和效期:

4-8度貯存,常溫運(yùn)輸,有效期1年。

用前必讀:

1. 和傳統(tǒng)的SDS-PAGE電泳液(Laemmli系統(tǒng),1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液,25 mM Tris,192 mM Glycine,0.1% SDS,pH8.3)相比,本快速電泳液可以大幅加快電泳速度,縮短電泳時(shí)間。推薦200-250 V恒壓電泳,低于10%膠濃度凝膠通常20-35分鐘就能完成電泳。

2. 使用快速電泳緩沖液單板膠電泳時(shí),穩(wěn)壓200 V,起始電流在45-60 mA,如果同時(shí)電泳2板膠或者4板膠,電流會(huì)升高,請根據(jù)需求采取降溫措施。

3. 對于低濃度例如6%、8%或10%的固定濃度膠,本快速電泳液比傳統(tǒng)電泳液具有更好的分離效果,可以達(dá)到類似梯度膠的分離效果,更適合小分子量蛋白電泳,蛋白Marker 10 kD條帶清晰分離。產(chǎn)生相同分離效果時(shí),使用本快速電泳液可使用濃度更低的分離膠,例如使用傳統(tǒng)電泳液對10%、分離膠進(jìn)行電泳時(shí),使用本快速電泳液時(shí)對應(yīng)的分離膠只需要8%即可,電泳效果基本一致,并且由于膠濃度較低,可以增強(qiáng)轉(zhuǎn)膜效率,提高WB檢測靈敏度。

4. 本快速電泳液含有SDS,適用于變性膠蛋白電泳,不適用于非變性電泳(Native-PAGE)。

5. 該快速電泳緩沖液建議用于經(jīng)典Laemmli系統(tǒng)配制的凝膠,經(jīng)測試可以達(dá)到最優(yōu)的分離效果。對于其他電泳系統(tǒng)如Bis-Tris系統(tǒng),HEPES系統(tǒng),Tris-醋酸系統(tǒng),Tricine系統(tǒng)等,需要經(jīng)過驗(yàn)證測試后使用。

6. 本快速電泳液可以適當(dāng)回收,回收后的電泳液可以作為外槽電泳液再使用1-2次。如果希望獲得最佳的電泳效果,請勿使用回收的電泳液。內(nèi)槽緩沖液每次都需要使用新鮮配制的電泳緩沖液。

使用說明:

1.  即用型快速蛋白電泳緩沖液配制:

快速蛋白電泳緩沖液配制量

500 ml

1 L

20×緩沖液

25 ml

50 ml

超純水

475 ml

950 ml

注:配制好的1×電泳緩沖液建議4℃貯存,可保存1-2周。如果出現(xiàn)變色或沉淀請重新配制新鮮的電泳液。

2.  電泳條件:

全程恒壓電泳,電壓建議為200-250 V。一般情況下,恒壓250 V電泳時(shí),對于濃度為10%的分離膠僅需~22分鐘即可完成電泳。如果需獲得更加平整和銳利的條帶,可以把電壓調(diào)整為150 V,此時(shí)電泳時(shí)間需要適當(dāng)延長。

電泳電壓與電泳時(shí)間(min)對照表

Laemmli凝膠濃度

6%

8%

10%

12%

15%

200 V

~30

~30

~33

~40

~48

250 V

~18

~18

~22

~30

~35


●  不同蛋白大小選擇不同的分離膠濃度,參考下表:

Laemmli系統(tǒng)

SDS-PAGE分離膠濃度

最佳分離范圍(kD

快速蛋白電泳緩沖液

最佳分離范圍(kD

1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液

6%

15-300

50-350

8%

10-250

35-300

10%

5-150

20-150

12%

3-100

15-100

15%

低于60

10-80



實(shí)驗(yàn)示例:


       SDS-PAGE快速電泳液(TG190)用于各種濃度分離膠的電泳效果圖
上圖為各種濃度分離膠使用快速電泳液的效果圖,
下圖為相同凝膠使用傳統(tǒng)的Tris-甘氨酸電泳液(TG120)的效果圖。 
6%~15%的凝膠使用SDS-PAGE凝膠配制試劑盒配制(RTD6116)
樣品:1,2 使用5×雙色蛋白上樣緩沖液 (變性,還原)(PL090)配制;
3 三色預(yù)染寬分子量蛋白Marker II(10-250 kD)(RTD6149),上樣5 μl;
4 雙色預(yù)染寬分子量蛋白Marker(10-170KD)(RTD6105),上樣5 μl; 
電泳條件:恒壓200 V




 
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